液相色谱仪使用操作规程
液相色谱仪使用操作规程总流程：
超纯水冲洗柱——流动相分离样品——超纯水冲洗柱 ——纯乙睛保存柱
1． 电源准备
打开稳压器（ ）电源开关，须待电压指示至 220V 后，才能开启其他有关设备。
2． HP1100 高效液相色谱仪的准备
试剂：三氟乙酸
乙腈(Fisher 公司产品色谱纯)
超纯水(Millipore 超纯水)
冰乙酸
溶液配置：贮液瓶与流动相的准备
A 液 0.1%三氟乙酸 （三氟乙酸 1ml，超纯水 999ml）室温保存
B 液 60%乙腈 （乙腈 600ml， 超纯水 400ml）室温保存
样品液 0.01%乙酸 （冰乙酸 10 l 超纯水 100ml）室温保存
泵头冲洗液：精滤后超纯水或者是 1%色谱纯甲醇 室温保存
注：贮液瓶应用超纯水淌洗干净，备用。
流动相溶剂用洁净 G4 玻沙漏斗精滤除去微小颗粒（目前未滤过溶液）。
操作者必须清楚并注明 A、B 贮液瓶盛装为何种溶剂。
冲 洗 泵 头 ： 用 注 射 管 于 软 塑 料 管 末 端 抽 吸 至 有 水 流 出 ， 调 节 流 速 开 关 控 制 流 速 为20-30drop/min.（目前我们很少冲泵头。）
① 流动相管道排气
如果，管道中气泡较多，可通过弹击管道，排除气泡，并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动，用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除完全。操作时，我们通常已经打开了脱气机（气泡严重影响分离效果，所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。）
② 开机
③ 进入 HP1100 操作系统
a.双击 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 图标，进入 HP1100 工作站软件操作界面。单击工作站操作界面上方 Run control 菜单，在下拉菜单中找到 Sample Info 子菜单，单击。在 Sample Info 信息框内定义操作者、样品前缀及编号、保存路径等参数。在保存路径项下，将可定义子目录分别输入操作者拼音缩写，以方便检索时互不干扰。
b.等待工作站操作界面中泵、柱温箱、检测器各指示图标由灰色转变为绿色后，单击泵、检测器各图标可从其各自弹出的菜单中设定流动相各溶剂比例、流速等。
（1） 流速通常为 1ml/min。检测波长通常为 280，或者 254nm。
（2） A 液设置为 100%，运行 15-30 分钟（目的是色谱柱的预平衡），观察基线走势，基线应为直线，通过单击“Balance”键可将基线调至零点。待基线平稳后可进样。
（3） 调整 A 液为 0，B 液为 100%再运行 60 分钟（此时乙腈实际浓度为 60%）
（4） 在 A 液冲洗同时进行进样环的冲洗：用 500ul 的针样注射器，在 load 状态，注入超纯水 500ul。（反复三次，若是 20ul 进样环，则加入 20ul 以上，多余的水可废液管流出。通常同一样品上样 30 次后应冲洗进样环，如果不同样品，最好，每次上样前均进行冲洗。）
（5） 吸取一定量可直接进样的样品溶液（上样液最好用滤器滤过），将进样阀逆时针旋至Load 档，将进样针从进样孔处水平推入，按进样器活塞将样品溶液注射入进样环后，立即将进样阀顺时针方向旋至 Inject 档，与此同时，数据开始自动收集。
（6） 此时样品分析已经完成。在 HP1100 主操作界面的检测器图标，关闭检测器，然后关闭色谱仪主机检测器开关（目的是延长检测器寿命）。将 B 通道调为 0，A 通道调为 100%，即 A 液冲洗色谱柱约 10-30min。用 A 液续冲洗色谱柱约 10-30m（目的是冲出柱内残留的杂质）
（7） A 通道换为 C 通道（100%乙腈）续冲洗色柱约 10-30min。（目的主要为保护柱）
④ 数据记录的终止与保存
电脑将自动收集并保存数据，终止运行后，将自动弹出数据框，或者可通过 DATA ANALYSIS菜单，调出资料。
3． 图谱处理
4． 关机
1） HP1100 的关闭
在 HP1100 的主操作界面上分别单击关闭泵、检测器图标，或通过菜单关闭 。然后，单击HP1100 的主操作界面右上方“X”，退出 Instrument 1 online 程序，返回至 WIN-95 操作界面。单击左下角“Start”菜单，单击“Shut down”,等待关机，待出现“Restart”提示后，按电脑主机电源键，关闭电脑主机及显示器。将所有使用仪器用布盖好。关闭排气扇、空调与稳压器开关。
2） 清洁卫生
实验完毕后，打扫仪器室桌面与地面清洁，保持桌面整洁。
3） 仪器使用记录
记录当天的仪器使用情况于指定记录本上，包括仪器使用起止时间与出现问题的解决方案，并签上操作者的名字
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